resolution
聚类粒度
调节图聚类切分的细致程度。
通常产生较少、较粗的 cluster。
通常产生更多 cluster,也更容易过度分群。
不要只列指标:把证据放回一个判断情境
先用类比建立直觉,再把每项观察放回研究问题,最后决定结论应该停在哪里。
像把一张城市地图切成不同大小的街区
resolution 不是把细胞变多,而是改变邻居图中社区划分的粒度。切得更细,可能看见真实小街区,也可能把同一街区的噪声误切成几块。
肺纤维化样本的 C3 是否值得拆成两个亚群?
情境:在 0.8 的 resolution 下,C3 具有 COL1A1、DCN 和 COL3A1 的成套信号;提高到 1.2 后,C3 被拆成 C7 与 C8。
问题:这两个新群代表真实成纤维细胞状态,还是同一群被算法切得更细?
观察:C7 在三个独立样本中都有细胞、marker 方向一致且低质量比例没有升高;C8 几乎全部来自一个样本,且主要由高 percent.mt 细胞组成。
确认新增分区是否形成独立表达程序
同时看正 marker、负 marker、logFC 和阳性比例;单个基因升高不够。
若新增群有一组相互一致且具有谱系特异性的 marker,切分更有生物学解释。
若只是 MT、核糖体或应激基因升高,切分可能反映质量而不是身份。
没有 marker 或 marker 在相邻群同样升高时,暂时只能称为计算亚群。
C7 同时有 COL1A1、DCN、COL3A1,而 C8 只有 percent.mt 偏高,因此两者不能同等命名。
resolution 只能提出候选分区;保留一个新群需要 marker、稳定性、跨样本支持和研究问题同时形成闭环。
C7 可以作为候选 fibroblast 亚群继续做 FeaturePlot 和独立验证;C8 目前更像 QC 或样本驱动的过度分群。
这仍不能证明细胞谱系、真实状态转换或机制因果,必须结合参考图谱、实验标记或功能实验。
什么时候应该停止继续解释?
当新增切分不能同时通过 marker、稳定性、跨样本支持和问题相关性检查时停止继续提高;宁可保留较粗但可复核的标签。
- 新群极小、只来自一个样本或低质量细胞
- 没有独立 marker,只由 UMAP 视觉分离支持
参数改变的是分析假设与取舍,不是把结果调到“正确答案”。